POSTER Un guide pratique d'utilisation des kits Elisa : le cas des mycotoxines

Français

A practical guide to correctly use the ELISA kits: the case of mycotoxins

Veron-Delor Guislaine (1) ; Raimbault Jean-Michel (2)

(1) IRTAC puis Arvalis Institut du végétal ; (2) Arvalis Institut du végétal

Face aux évolutions règlementaires des teneurs en mycotoxines et la nécessité pour les professionnels de contrôler les lots de céréales et produits céréaliers, l'IRTAC (Institut de Recherche Technologique Agroalimentaire des Céréales) a réuni, sous forme de groupe de travail, les représentants des filières céréales afin de réaliser un « guide d'utilisation des kits immunoenzymatiques », dits « méthodes rapides » ou « kits Elisa ». Ce guide vise à faciliter et sécuriser l'application de ces méthodes d'évaluation des teneurs en mycotoxines par l'ensemble des opérateurs et notamment des producteurs. Aujourd'hui les kits Elisa permettent d'obtenir des résultats quantitatifs rapides. Néanmoins, certaines précautions d'utilisation doivent être respectées. Partant du constat partagé par les fournisseurs et les utilisateurs de « kits Elisa » que les fiches techniques disponibles manquent de précisions pour garantir la fiabilité des résultats obtenus, ce guide apporte aux utilisateurs les éléments essentiels leur permettant d'obtenir des résultats plus fiables et plus reproductibles. Le guide d'utilisation des kits détaille les consignes sur les différentes étapes de leur mise en oeuvre, de la préparation de l'échantillon à la validation des résultats, en passant par la réalisation de l'analyse elle même. Il attire aussi l'attention des utilisateurs sur l'influence des effets de matrice sur le résultat et de la spécificité non uniforme des différents kits (réactions croisées pouvant souvent expliquer les sous-estimations ou les surestimations). En marge de chaque étape, des points critiques sont identifiés sur lesquels les utilisateurs doivent apporter une attention toute particulière pour garantir la fiabilité des résultats, notamment concernant : - le domaine d'application du kit (contaminant et matrice) ; - les bonnes pratiques de laboratoires pour la réalisation des dosages (métrologie des appareils, contenants utilisés ) ; - les paramètres fondamentaux tels que la granulométrie de l'échantillon, la qualité de l'eau, le pH de la solution de lavage, la température des réactifs, les temps d'agitation et de réaction ; - les étapes critiques comme l'extraction, le lavage. Ce guide met ainsi l'accent sur une utilisation précise des kits Elisa afin d'éviter des interprétations hâtives et erronées tout en précisant le cadre de leurs applications qui reste le screening des lots (allotement, contrôle durant le stockage, contrôle avant expédition ).

céréale ; mycotoxine ; kit Elisa ; méthode rapide ; guide d'utilisation

cereal ; mycotoxin ; Elisa kit ; rapid test ; practical guide

In front of the regulatory evolutions setting maximum levels of mycotoxins and the need for the professionals to check the batches of cereals and cereal products, IRTAC (Institut de recherche technologique agro-alimentaire des céréales) joined together, in the form of a working group, the representatives of the network cereals in order to produce a "user guide of immunoenzymatic kits", also called "fast methods" or "Elisa kits". This guide aims at facilitating and at securing the application of these methods of evaluation of the contents of mycotoxins by all the operators in particular the producers. Today kits Elisa allow to obtain fast quantitative results. Nevertheless, some care of use must be respected. Leaving the report shared by the suppliers and the users of " kits Elisa " that the available specification sheets are be lacking in precisions to guarantee the reliability of the obtained results, this guide brings to the users the essential elements allowing them to obtain results more trusted and reproducible. The user guide details the orders on the various stages of their setting, from the preparation of the sample to the validation of the results, by way of the realization of the analysis it - even. It also draws the attention of the users on the influence on the result of the effects of matrix and the non-uniform specificity of the different kits (cross reactions which can often explain under-estimates or or over-estimates). In margin of every stage, critical points are identified on which the users have to bring a quite particular attention to guarantee the reliability of the results, notably concerning: - the domain of application of the kit (contamination and matrix); - the good laboratories practices for the realization of the analysis (metrology of devices, used packaging ); - the fundamental parameters such as the granulometry of the sample, the quality of the water, the pH of the washing solution, the temperature of the reagents, time of agitation and reaction; - the critical stages as the extraction, the washing. This guide thus emphasizes a precise use of kits Elisa to avoid hasty and erroneous performances while specifying the framework of their applications which remains the screening of the batches (allotement, checks during the storage, checks before expedition ).

2007

2. Connaissances nécessaires au suivi et à la la traçabilité des fusariotoxines de la récolte au consommateur